特异性下调热休克蛋白A12B加重脂多糖诱导细胞炎症大鼠腹主动脉内皮细胞损伤
梁群
潘郭海容
田圆
杨洋
李帅
150040 黑龙江 哈尔滨,黑龙江中医药大学
摘要：目的 通过特异性下调脂多糖(LPS)诱导细胞炎症大鼠腹主动脉内皮细胞(RAAEC)热休克蛋白A12B(HSPA12B)的表达,观察不同表达水平HSPA12B对RAAEC生物学特性的影响,探讨HSPA12B对脓毒症内皮功能调控的潜在机制.方法 使用针对HSPA12B mRNA序列设计的siRNA转染RAAEC,构建LPS诱导细胞炎症模型.分三组,即空白对照组(RAAEC+20％DMEM培养基)、LPS模型组(RAAEC+20％DMEM培养基+1 mL PBS将1 mg LPS溶解后的溶液)、LPS+siRNA转染组(基因转染后RAAEC+1 mL PBS将1 mg LPS溶解后的溶液).观察各组RAAEC中HSPA12B mRNA及蛋白表达水平的变化,使用透射电子显微镜观察内皮细胞形态及内部超微结构形态改变,采用酶联免疫吸附法测定内皮细胞内皮素-1(ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量变化.结果 LPS+siRNA转染组HSPA12B mRNA及蛋白水平与LPS模型组比较均明显下调(P<0.05),透射电子显微镜下观测到LPS+siRNA转染组细胞膜呈虫蚀样变,胞质内空泡明显增多,线粒体肿胀变性.与空白对照组比较,LPS模型组、LPS+siRNA转染组ET-1含量增高(pg/mL:405.28±37.95 vs.1141.18±115.27 vs.1487.09±108.18,P<0.05),且LPS+siRNA转染组高于LPS模型组(P<0.05);与空白对照组比较,LPS+siRNA转染组eNOS含量降低(μU/g:1687.98±81.38 vs.940.16±50.79 vs.658.37±55.06,P<0.05),且LPS+siRNA转染组低于LPS模型组(P<0.05).结论 特异性下调LPS诱导RAAEC细胞炎症大鼠HSPA12B的表达,能降低RAAEC对炎症反应的耐受能力,加重RAAEC损伤程度.
关键词：热休克蛋白A12B(HSPA12B)大鼠腹主动脉内皮细胞(RAAEC)细胞炎症反应内皮细胞损伤
资助基金：国家自然科学基金(81974557)国家自然科学基金(81774276)国家中医药管理局新冠肺炎中医药应急专项课题(2020ZYLCYJ06-2)哈尔滨市科技创新人才研究专项(2017RAXXJ037)黑龙江中医药大学校级科技创新研究平台项目(2018pt06)
论文发表日期：2021-06-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 517-523 )
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