丁酸钠经AMPK/Nrf2/HO-1信号通路调节脂多糖诱导肺泡巨噬细胞极化的作用机制
陈健1
周卫东2
王艳华3
刘勤富4
杨晓军4
1.750004 宁夏银川,宁夏医科大学临床医学院;750004 宁夏银川,宁夏回族自治区干细胞与再生医学重点实验室2.750004 宁夏银川,宁夏医科大学临床医学院3.750004 宁夏银川,宁夏医科大学总医院妇科宫颈病变中心实验室4.750004 宁夏银川,宁夏医科大学总医院重症医学科
摘要：目的 探讨丁酸钠(sodium butyrate,SB)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肺泡巨噬细胞极化的影响及其作用机制.方法 小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S细胞)随机分为对照(Control)组、LPS组、SB组、LPS+SB(LB)组、LPS+SB+腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(Compound C)(LC)组、LPS+SB+核因子E2 相关因子 2(Nrf2)抑制剂(ML385)(LM)组.通过CCK8 检测MH-S细胞活力,筛选出最佳的1 000 ng/mL LPS、1 mmol/L SB、10 μmol/L Compound C、5 μmol/L ML385 药物浓度进行后续实验;实时荧光定量(qRT-PCR)检测MH-S细胞白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞分化抗原86(CD86)、巨噬细胞甘露糖受体(CD206)、AMPK、Nrf2 和血红素加氧酶 1(HO-1)的mRNA表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养基上清IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-10 蛋白含量;流式细胞术测定M1 和M2 型巨噬细胞相关标记物CD86 和CD206 的表达.各组数据通过单因素方差分析和Tukey法进行检验.结果 通过CCK8 选取了1 000 ng/mL LPS、1 mmol/L SB、10 μmol/L Compound C和 5 μmol/L ML385 进行造模和干预.qRT-PCR和ELISA结果一致显示,与LPS组比较,LB组M1 型巨噬细胞相关促炎细胞因子IL-6、TNF-α、IL-1β显著降低(均P<0.01),但M2 型巨噬细胞相关抑炎细胞因子IL-10 显著升高(均P<0.01).qRT-PCR和流式细胞术结果一致显示,与Control组比较,LPS组CD86 水平显著升高(均P<0.01),SB组差异无统计学意义;与LPS组比较,LB组CD86表达水平显著降低(均P<0.01),但M2 型巨噬细胞标记物CD206 的变化趋势与CD86 相反.qRT-PCR结果显示,与LPS组比较,LB组促进AMPK/Nrf2/HO-1 的表达(均P<0.05);与LB组比较,LC组降低了AMPK/Nrf2/HO-1的表达(均P<0.05),LM组降低了Nrf2/HO-1 的表达(均P<0.05).流式细胞术结果显示,与LB组比较,LC组和LM组逆转了SB对CD86 水平的抑制作用(均P<0.01);M2 型巨噬细胞标记物CD206 的表达趋势与M1 型巨噬细胞标记物CD86 相反.结论 SB通过激活AMPK/Nrf2/HO-1信号通路,抑制LPS诱导的M1 型、促进M2 型肺泡巨噬细胞极化,改善了炎症反应.
关键词：丁酸钠巨噬细胞极化炎症白细胞分化抗原86巨噬细胞甘露糖受体腺苷酸活化蛋白激酶核因子E2相关因子2血红素加氧酶1
资助基金：宁夏回族自治区自然科学基金项目(2023AAC03559)
论文发表日期：2024-02-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 156-163 )
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