下调PDCD4抑制MAP2K3和p38 MAPK的表达减轻LPS诱导的肾小管上皮细胞炎症和凋亡
蒋伟1
张益楠2
张健锋3
黄中伟1
1.226001 江苏 南通,南通大学附属医院急诊内科2.226001 江苏 南通,南通大学附属医院皮肤科3.226001 江苏 南通,南通大学附属医院消化内科
摘要：目的 研究程序性细胞死亡蛋白4(programmed cell death protein 4,PDCD4)在脓毒症诱导的急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中的作用机制,以及调控PDCD4 表达通过丝裂原活化蛋白激酶 3(mitogen-activated protein kinase 3,MAP2K3)和 p38 蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)对脓毒症 AKI 起到潜在治疗作用.方法 用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激人肾小管上皮细胞(HK-2)构建脓毒症AKI细胞模型.进一步用腺病毒介导siRNA和过表达载体抑制和上调AKI细胞模型中PDCD4 的表达;CCK-8 法检测细胞增殖;用DCFH-DA及激光共聚焦显微镜检测细胞中 ROS水平,用总 SOD活性检测试剂和MDA检测试剂盒检测细胞中SOD和MDA水平;免疫共沉淀验证PDCD4 和MAP2K3 之间的蛋白相互作用;TUNEL染色法检测细胞凋亡;RT-qPCR和Western blot检测 PDCD4 及相关基因的mRNA和蛋白表达水平;ELISA法检测患者血清中炎症相关因子水平.结果 LPS诱导可以促进HK-2 细胞中PDCD4 表达,下调PDCD4 可抑制LPS诱导的HK-2 细胞的炎症、氧化应激及细胞凋亡.数据库预测及免疫共沉淀证实PDCD4 可以与MAP2K3 相互作用,且在LPS诱导的HK-2细胞中,MAP2K3 表达水平显著增强.MAP2K3 过表达和p38 MAPK激动剂可以减轻PDCD4 下调对LPS诱导的细胞炎症和氧化应激的影响并抑制细胞凋亡.结论 下调PDCD4 可以通过抑制MAP2K3 和p38 MAPK从而抑制LPS诱导的肾小管上皮细胞的炎症和凋亡.
关键词：急性肾损伤脓毒症程序性细胞死亡蛋白4丝裂原活化蛋白激酶3p38蛋白激酶活性氧超氧化物歧化酶丙二醛
资助基金：南通市科技计划项目(JCZ2022020)
论文发表日期：2024-04-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 305-313 )
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