圣草次苷调节SphK1/S1P通路对脂多糖诱导的脓毒症内皮细胞炎症损伤的影响
张开亚
徐瑶瑶
杨琴
李夏
325000 浙江温州,浙江中医药大学附属温州市中医院重症医学科
摘要：目的 研究圣草次苷对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症内皮细胞炎症损伤的修复作用,并基于鞘氨醇激酶1(SphK1)/1-磷酸鞘氨醇(S1P)通路探讨圣草次苷对脓毒症内皮细胞的作用机制.方法 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为空白对照组、模型组、圣草次苷低、中、高剂量组及阳性组,模型组、圣草次苷低、中、高剂量组及阳性组分别加入终浓度为100 ng/mL的脂多糖(LPS),继续培养24 h,制备脓毒症模型.圣草次苷低、中、高剂量组分别加入终浓度为100、200、400μg/mL的圣草次苷,阳性组加入终浓度为10 µmol/L的新补骨脂异黄酮,空白对照组及模型组加入等量培养液.使用酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒测定HUVEC上清一氧化氮(NO)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、干扰素(IFN)-γ、IL-8和细胞髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、C反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH),使用跨膜电阻仪测定跨膜电阻(TER),荧光标记法测定HUVEC通透性,使用凋亡试剂盒测定HUVEC凋亡率,实时定量聚合酶链式反应(PCR)和免疫印记法(Western blot)分别测定各组HUVEC的SphK1及S1P信使核糖核酸(mRNA)及蛋白水平.结果 与空白对照组比较,模型组HUVEC上清NO、IL-6、TNF-α、GM-CSF、MCP-1、IFN-γ 及 IL-8 水平,MPO、MDA、CRP、LDH 水平,HUVEC 通透性及凋亡率,SphK1及S1 P mRNA及蛋白水平升高,SOD及TER降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,圣草次苷低、中、高剂量组及阳性组HUVEC上清NO、IL-6、TNF-α、GM-CSF、MCP-1、IFN-γ 及 IL-8 水平,MPO、MDA、CRP、LDH 水平,HUVEC 通透性及凋亡率,SphK1 及 S1P mRNA及蛋白水平降低,SOD及TER升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 圣草次苷能够显著抑制LPS诱导的脓毒症内皮细胞炎症反应,改善LPS诱导的脓毒症内皮细胞氧化损伤,修复脓毒症内皮细胞通透性,进而抑制脓毒症内皮细胞凋亡,其机制可能与调节SphK1/S1P通路有关.
关键词：圣草次苷SphK1/S1P通路脓毒症炎症损伤
论文发表日期：2025-02-09
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 157-162 )
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