小鼠骨髓间充质干细胞的分离及其诱导定向脂肪细胞分化
焦嫦亮1
张阳德2
谢祁阳3
潘一峰2
1.海南省干细胞研究所,海南海口市,570102;中南大学生物医学工程研究院,湖南,长沙市,4100782.中南大学生物医学工程研究院,湖南,长沙市,4100783.海南省干细胞研究所,海南海口市,570102;中南大学湘雅医学院生理学系,湖南,长沙市,410078
摘要：目的 建立小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离和鉴定方法,稳定和优化骨髓MSCs在体外定向向脂肪细胞分化的适宜诱导条件.方法 采取贴壁细胞分离法分离和纯化小鼠骨髓MSCs;选用第5代MSCs分别采用CFU-f培养法和CFU-f集落再克隆生成CFU-f集落法鉴定MSCs的增殖和自我更新能力;利用不同组合的成脂培养基定向诱导MSCs分化为脂肪细胞;利用油红O免疫组化染色鉴定分化后的细胞.结果 分离和纯化的小鼠骨髓MSCs呈均匀有序的成纤维母细胞样形态;植入2×103～1×105MSC细胞/皿时,可生成不同比例的纯的CFU-f集落,且数量与种入的细胞数呈良好的线性关系;小型CFU-f集落再克隆生成CFU-f集落的能力较弱,而大型CFU-f集落具有较高的再克隆生成CFU-f集落的能力,再克隆生成CFU-f集落率高达90%,而且1个目的集落可再克隆生成多个CFU-f集落;不同诱导方案均可诱导MSC生成脂肪细胞,而合用地塞米松(DM)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、胰岛素(IS)和消炎痛(ID)时效果最佳,诱导MSC生成脂肪细胞的效率可高达96%以上,且生成的细胞绝大多数为成熟脂肪细胞.结论 采取贴壁细胞分离法经过长期传代可得到纯化的小鼠骨髓MSCs,MSCs具有高度增殖、自我更新和定向分化为脂肪细胞的能力;DM、IBMX、IS和ID 4种诱导剂合用可诱导96%以上的该细胞定向分化为成熟脂肪细胞.
关键词：小鼠间充质干细胞脂肪细胞组织工程
分类号：Q813.1(细胞工程)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 682-684,中插1 )
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