骨髓间充质干细胞细胞周期同步化的方法及对向神经细胞分化的影响
李曼丽1
赵文2
高钰丹2
段红梅1
杨朝阳2
李晓光3
1.北京航空航天大学生物与医学工程学院,北京市,1001912.首都医科大学基础医学院,北京市,1000693.北京航空航天大学生物与医学工程学院,北京市100191; 首都医科大学基础医学院,北京市100069
摘要:目的:分析不同处理条件下细胞同步化于G0/G1时期的效果以得到最佳的同步化条件,并研究同步化对骨髓间充质干细胞(BMSCs)在碱性成纤维细胞因子(bFGF)的作用下分化为神经细胞的影响。方法分离培养成年大鼠BMSCs,5%、1%、0.5%、0.1%、0胎牛血清(FBS)分别处理24 h、48 h。PI染色后经流式细胞仪检测细胞周期各时相细胞所占比例,与正常培养条件(10%FBS)处理下对比。得到最佳处理条件后,bFGF处理3 d、7 d,免疫荧光细胞化学方法检测Nestin和Tuj-1的表达。结果成年大鼠BMSCs原代提取,经传代后,细胞形态为长梭形。不同处理条件下G1/G0期细胞比例均高于正常培养条件,1%FBS处理48 h时G1/G0期细胞比例为(94.274±0.468)%,达最高峰(F=39.91, P<0.001)。bFGF诱导3 d后,细胞周期同步化后的Nestin+细胞数显著高于未同步化的细胞数[(80.3±2.4)%vs.(12.1±1.5)%](F=28.25, P<0.001);bFGF诱导7 d后,同步化后的Tuj-1+细胞数显著高于未同步化的细胞数[(74.8±3.2)%vs.(19.3±2.5)%](F=17.95, P<0.001)。结论1%FBS处理48 h是将BMSCs同步化于G0/G1期的最佳条件。细胞周期同步化于G0/G1期能够提高BMSCs向神经细胞分化的比例。
关键词:骨髓间充质干细胞细胞周期同步化血清饥饿法神经分化大鼠
分类号:R329.2(人体形态学)
资助基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2012AA020206)国家自然科学基金(No.31271037)国家自然科学基金(No.31320103903)国家科技支撑计划(No.2012BAI17B04)高等学校全国优秀博士学位论文作者专项(No.201356)国家国际科技合作专项基金(No.2014DFA30640)国家自然科学基金(No.31130022)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1399-1403 )
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中国康复理论与实践

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北大核心CSTPCD
ISSN:1006-9771
年,卷(期):2016,22(12)
所属栏目:基础研究