PCNA反义脱氧寡核苷酸体外抑制BT325细胞增殖的实验研究
李美华1
朱贤立2
1.江西医学院第一附属医院神经外科,南昌,3300062.华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科,武汉,430022
摘要：目的观察增殖细胞核抗原(PCNA)基因反义脱氧寡核苷酸对人多形性胶质母细胞瘤细胞增殖的影响.方法采用人工合成的PCNA反义和正义脱氧寡核苷酸经阳离子脂质体包裹后转染人多形性胶质母细胞瘤细胞BY325.用MTT比色法检测转染后瘤细胞的生长抑制率;3H-TdR法检测细胞DNA合成速率;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR检测PCNA mRNA表达;免疫组化方法检测PCNA蛋白表达水平.结果PCNA反义寡核苷酸可明显抑制BT325细胞的生长;明显减慢其DNA合成速率,阻滞细胞由G0/Gl期→S期,PCNA mRNA及其蛋白质表达也同时受到抑制.抑制效应在转染后12 h即出现,24 h达到高峰,48 h后逐渐减弱.抑制作用随反义寡核苷酸浓度的升高而增强,0.8μM PCNA反义寡核苷酸的细胞生长抑制率达84.6%.同样浓度的正义寡核苷酸和脂质体则无明显的细胞生长抑制作用.结论PCNA反义寡核苷酸在体外能明显抑制人脑多形性胶质母细胞瘤细胞BT325生长、DNA合成、mRNA和PCNA蛋白表达.PCNA基因可望成为胶质瘤基因治疗的新靶点.
关键词：增殖细胞核抗原神经胶质瘤反义寡核苷酸细胞增殖基因治疗
分类号：R739.41(神经系肿瘤)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 103-106 )
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