稳定低表达BAG3的胶质母细胞瘤U87细胞株的构建及鉴定
李继强
杨吉安
邵灵敏
吴庭枫
刘宝辉
陈谦学
1.武汉大学人民医院神经外科,武汉,4300602.武汉大学人民医院神经外科,武汉,4300603.武汉大学人民医院神经外科,武汉,4300604.武汉大学人民医院神经外科,武汉,4300605.武汉大学人民医院神经外科,武汉,4300606.武汉大学人民医院神经外科,武汉,430060
摘要：目的：探讨构建稳定低表达BAG3的胶质母细胞瘤U87细胞株的方法。方法利用RNA干扰技术提取pEGFP-BAG3-shRNA质粒后采用ABI3130基因测序仪进行测序鉴定，将鉴定后的质粒分别转染到胶质母细胞瘤U87细胞株，利用嘌呤霉素筛选转染的U87细胞，通过RT-PCR、免疫印迹分析和免疫荧光染色等技术对转染后的U87细胞进行鉴定。结果pEGFP-BAG3-shRNA质粒测序结果包含干扰序列，筛选后的干扰组和对照组U87细胞转染效率分别为85%和93%，RT-PCR结果显示shBAG3质粒干扰组BAG3 mRNA表达量显著低于对照组（P<0.05）；免疫印迹分析及免疫荧光染色结果显示shBAG3质粒干扰组BAG3蛋白表达量显著低于对照组（P<0.05）。结论本研究所构建的胶质母细胞瘤U87细胞株能稳定低表达BAG3，可用于后续BAG3在胶质母细胞瘤中的生物学作用及相关信号通路的研究。
关键词：胶质母细胞瘤U87细胞株BAG3RNA干扰
分类号：R739.41(神经系肿瘤)Q789(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 353-356 )
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