Ad-GFP转染兔离体基底动脉环的研究
骆杨1
徐义昌1
徐善水2
1.宣城市人民医院神经外科,安徽,2420002.皖南医学院弋矶山医院神经外科,安徽芜湖,241001
摘要：目的 通过将将携带有绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)转染兔离体基底动脉环,观察GFP表达部位及表达量的变化.方法 获取兔基底动脉环,置入含DMEM的96孔板中;加入1.8×106 pfu/μl的Ad-GFP转染1h;转染后即刻3、5、7d行冰冻切片,荧光显微镜观察亮绿色物质.另外,将不同病毒浓度(分别为1.2×105、1.2×106、1.8×106和2.4×106 pfu/μl)转染离体血管环1h后,培养3d后行冰冻切片,用荧光显微镜观察结果.结果 荧光显微镜下观察发现,基底动脉环管壁各层均表达GFP,但主要位于血管内皮层,1 000倍下在内皮细胞内中明确观察到荧光颗粒.1.8×106 pfu/μl的Ad-GFP转染后发现,GFP在转染3d后表达最明显,5d次之,而7d后表达最弱;不同浓度Ad-GFP转染3d后发现,浓度为1.2× 105 pfu/μ,l时,管壁有较弱绿色荧光,浓度不断升高亮度有所增强,浓度为1.8×106 pfu/μl时达到最高峰,浓度继续增加时荧光亮度未见进一步增强.结论 Ad-GFP可以成功转染入离体血管环中,以内皮层为主;3d为病毒转染后最佳培养时间.
关键词：基底动脉环体外培养基因转染绿色荧光蛋白新西兰纯种大白兔
分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)Q786(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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