靶向沉默Wip1基因表达对胶质瘤细胞增殖及放疗敏感性的作用
尹雷1
王鹏2
侯崇显2
李炎稳2
周东1
1.510515广州,南方医科大学第二临床医学院;510080广州,广东省人民医院、广东省医学科学院神经外科2.广东省人民医院、广东省医学科学院神经外科,广州,510080
摘要:目的探讨靶向沉默Wip1基因表达对脑胶质瘤细胞增殖及放疗敏感性的影响.方法体外培养人胶质瘤细胞株U251,用携带Wip1基因RNA干扰载体的慢病毒感染U251细胞沉默Wip1基因表达,然后对U251胶质瘤细胞进行放疗干预.根据对U251细胞处理方法分为4组:Wip1基因沉默后放疗组(IR+Wip1组)、单纯Wip1基因沉默组(Wip1组)、单纯放疗组(IR组)和NC组(空载体病毒感染U251细胞).CCK-8法检测细胞的增殖,实时定量PCR检测细胞Chk1、Chk2 mRNA表达,免疫印迹检测细胞Chk1、Chk2蛋白表达.结果U251细胞慢病毒感染后3~4 d,采用荧光显微镜观察,根据绿色荧光蛋白阳性表达判定感染效率,结果显示感染效率均90%以上.放疗后24、48、72、96、120 h,IR组和Wip1组增殖率均显著低于NC组(P<0.05),而IR+Wip1组细胞增殖率明显低于IR组和Wip1组(P<0.05).放疗后24 h,IR+Wip1组Chk1 mRNA表达明显低于Wip1组(P<0.05),明显高于IR组和NC组(P<0.05);IR+Wip1组Chk2 mRNA表达明显低于其他3组(P<0.05).IR+Wip1组Chk1蛋白表达明显低于IR组和NC组(P<0.05),Chk2蛋白表达低于其他3组(P<0.05).结论靶向沉默Wip1基因表达可抑制胶质瘤细胞的增殖,并可能通过抑制Chk1、Chk2的蛋白表达增加胶质瘤细胞对放疗的敏感性.
关键词:胶质瘤细胞放疗Wip1p53基因沉默细胞增殖
分类号:R739.41(神经系肿瘤)Q812(生物工程学(生物技术))
资助基金:国家自然科学基金(81201995)广东省医学科研基金(A2017183)广东省自然科学基金(2015A030313532)广东省科技计划(2014A020212678)
论文发表日期:2018-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 335-338 )
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