大鼠脑微血管内皮细胞的纯化培养与鉴定
鹿文葆
秦伟伟
刘淑英
李宏伟
修瑞娟
1.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院中国医学科学院微循环研究所,北京,1000052.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院中国医学科学院微循环研究所,北京,1000053.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院中国医学科学院微循环研究所,北京,1000054.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院中国医学科学院微循环研究所,北京,1000055.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院中国医学科学院微循环研究所,北京,100005
摘要：目的 探讨获取纯度较高的原代大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)的分离和培养方法.方法 选取10只3周龄Wistar大鼠,取大脑,去除白质,剪碎成大约1 mm3大小,通过两次酶消化、20% BSA离心和33%连续密度Percoll梯度离心,获得纯度较高的大脑微血管片段,接种于涂布明胶的35 mm dish培养皿中,加入含4 μg/ml嘌呤霉素的内皮细胞培养基,2d后更换新鲜培养基;采用倒置显微镜观察内皮细胞生长状况及其形态;免疫组化法检测BMECs标志物Ⅷ因子相关抗原(vWF)的表达,以及神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况.结果 培养24 h后可见内皮细胞从贴壁的脑微血管片段周围长出,细胞呈梭形;5-6d可形成融合;融合后的BMECs呈典型的"鹅卵石"样外观;免疫组化法检测显示BMECs的vWF表达阳性,GFAP表达阴性,内皮细胞纯度(vWF阳性细胞表达率)达96%以上.结论 该方法能够成功获得纯度较高的原代大鼠BMECs.
关键词：内皮细胞脑微血管细胞培养的大鼠体外研究
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 535-538 )
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