应用PCR-RFLP技术检测中枢神经系统感染患儿6种疱疹类病毒DNA的实验研究
尚世强
董关萍
余钟声
俞锡林
1.浙江大学医学院附属儿童医院,3100032.浙江大学医学院附属儿童医院,3100033.浙江大学医学院附属儿童医院,3100034.浙江大学医学院附属儿童医院,310003
摘要：目的建立一种能快速区分6种疱疹类病毒DNA特异的限制性内切酶图谱.方法 2002年1～12月浙江大学儿童医院在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物,该引物能同时扩增单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型(HSVI/HSVⅡ)、爱泼斯坦-马尔病毒(EBV)、人巨细胞病毒(CMV)、水痘-带状疱疹病毒(VZV)和人类疱疹病毒6型(HHV6)6种病毒.选择BstUI内切酶对PCR产物进行酶切.98例怀疑病毒性脑炎、脑膜炎患儿的脑脊液标本用PCR-RFLP和ELISA法进行检测.结果 6种标准病毒株PCR扩增后产物为510～592bp,经酶切后能区分为何种病毒,其最小检出量为0.1fg,与乙肝病毒、真菌、细菌和人类基因组无交叉反应.用该方法检测临床98份脑脊液标本中的疱疹类病毒,13份阳性,同时用ELISA法检测该标本,5例阳性.PCR阳性检出率为13.3%,ELISA为5.09%(P<0.05).2例患儿在院外阿昔洛韦已治疗2～3d,但入院后在其脑脊液中仍能检测到病毒DNA.10例诊断为疱疹病毒感染患儿经更昔洛韦每天10mg/kg,分两次静脉注射治疗14d后,8例临床症状明显好转,2例病情未见好转.结论建立的疱疹类病毒特异的限制性内切酶图谱具有特异敏感,快速准确的特点,且不受抗病毒药物的影响,为中枢神经系统疱疹类病毒感染的早期诊断提供了有效手段.
关键词：疱疹类病毒限制性酶切图谱中枢神经系统诊断
分类号：R72(儿科学)
资助基金：浙江省科技厅资助项目(011103999)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 611-613 )
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