婴幼儿小肠组织全长cDNA文库的构建及鉴定
张晖
张静
田杰
王琪
1.重庆医科大学儿童医院心血管内科,重庆,4000142.重庆医科大学儿童医院心血管内科,重庆,4000143.重庆医科大学儿童医院心血管内科,重庆,4000144.重庆医科大学儿童医院心血管内科,重庆,400014
摘要：目的 构建婴幼儿小肠组织全长cDNA文库,为进一步通过酵母双杂交方法搜寻与轮状病毒VP4蛋白相互作用的宿主细胞受体蛋白提供必要条件.方法 2006年11月至2007年9月从婴幼儿小肠组织中提取总RNA,并纯化mRNA,反转录合成第1链,连接EcoRI人工接头,分级分离后,除去小于500bp cDNA片段,与质粒pUra-M△polyA连接后,氯化钙法转化感受态细胞DH5α,测定文库大小并利用EcoRI-XhoI双酶切鉴定插入cDNA片段的大小.结果 构建成含有6×107重组子的婴幼儿小肠组织cDNA文库,插入片段的大小范围在0.5～2.0kb之间,平均长度1.5kb.结论 构建的文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆.
关键词：婴幼儿小肠组织cDNA文库
分类号：R72(儿科学)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 133-135 )
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