DOI: 10.7504/fk2014110113
活性氧介导P62蛋白激活参与甲氨蝶呤耐药绒癌发病机制研究
沈芸1
肖长纪2
于珊3
宫美轩3
赵静2
向阳2
1.国家人口计生委科学技术研究所,北京100081;中国医学科学院北京协和医院妇产科,北京1007302.中国医学科学院北京协和医院妇产科,北京1007303.济南市妇幼保健院妇产科,山东济南250000
摘要：目的 探讨甲氨蝶呤(MTX)耐药绒癌的发生机制.方法 2012年5月至2013年1月于北京协和医院以人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞及本课题组前期构建的MTX耐药绒癌JEG-3/MTXR细胞为研究对象,采用免疫印迹、RT-PCR法检测MTX处理后细胞内P62的变化.流式细胞仪检测MTX诱导后JEG-3/MTXR细胞内活性氧(ROS)变化,采用ROS清除剂MnTmPyP检测MTX作用后JEG-3/MTXR细胞内P62蛋白水平的变化.RNA干扰法沉默P62基因免疫印迹法和流式细胞仪检测MTX诱导后JEG-3/MTXR耐药细胞内PARP蛋白的表达和凋亡率的变化.结果 MTX可诱导耐药绒癌P62蛋白和mRNA表达水平呈时间依赖性上调.MTX可诱导耐药绒癌ROS表达水平升高,MnTmPyP降低P62蛋白的表达.P62-siRNA可促进JEG-3/MTXR细胞内MTX诱导的凋亡反应蛋白PARP的切割和激活,流式细胞仪检测RNA干扰联合药物组细胞凋亡率(14.4±1.02)％,高于单纯药物应用组(9.1±1.34)％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ROS介导P62蛋白激活参与MTX耐药绒癌发生机制,为耐药绒癌临床靶向治疗提供新思路.
关键词：绒癌耐药氧化应激反应P62
分类号：R737.3(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(No.81272890)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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