DOI: 10.7504/fk2015030116
ERCC1基因与卵巢上皮癌细胞铂类耐药相关性探讨
杜培1
王沂峰2
张晓薇3
陈礼全3
淦亚萍3
1.南方医科大学,广东广州,510515;南方医科大学珠江医院,广东广州5102802.南方医科大学珠江医院,广东广州,5102803.广州医科大学附属第一医院妇产科,广东广州,510120
摘要：目的 检测切除修复交叉互补1(ERCC1)基因在人卵巢上皮癌顺铂(DDP)耐药细胞株SKOV3/DDP及其亲本细胞株SKOV3中的表达,探讨ERCC1基因在卵巢上皮癌顺铂耐药中的意义以及有效沉默ERCC1基因能否有效逆转SKOV3/DDP细胞对DDP耐药.方法 于2013-2014年在南方医科大学采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western印迹法检测ERCC1 mRNA和蛋白在SKOV3/DDP及SKOV3细胞中的表达.人工构建3个靶向沉默ERCC1基因的短发夹状RNA(shRNA)质粒表达载体,慢病毒载体法转染至SKOV3/DDP细胞,RT-PCR和Western印迹法检测ERCC1基因水平并挑选沉默效果最佳的表达载体.RT-PCR和Westem印迹法检测稳定转染后SKOV3/DDP细胞中ERCC1基因的表达,CCK-8法检测转染细胞对DDP的耐药性.结果 SKOV3/DDP细胞中ERCC1 mRNA和蛋白的表达量明显高于SKOV3,差异有统计学意义(P＜0.01).稳定转染ERCC1 shRNA后的SKOV3/DDP细胞,ERCC1的mRNA及蛋白的表达量明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).细胞活性检测提示特异性沉默ERCC1基因能增加SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性(P＜0.05).结论 ERCC1基因在SKOV3/DDP细胞中的表达明显升高,有效沉默ERCC1基因能有效逆转SKOV3/DDP细胞对DDP耐药,增加卵巢上皮癌DDP耐药细胞对DDP的敏感性,为卵巢上皮癌耐药的治疗提供新靶点.
关键词：卵巢肿瘤小分子干扰抗药性肿瘤ERCC1基因
分类号：R737.3(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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