热刺激对人牙周膜细胞NLRP3/Caspase-1信号通路调控影响的初步探索
王飞
陶荣
倪龙兴
1.中国人民解放军联勤保障部队第904医院口腔科,江苏无锡2140002.南京大学医学院附属口腔医院,南京市口腔医院牙体牙髓病科,江苏南京2100083.军事口腔医学国家重点实验室,口腔疾病国家临床医学研究中心,陕西省口腔医学重点实验室,空军军医大学口腔医院牙体牙髓病科,陕西西安710032
摘要：目的 初步探索热刺激状态下,正常及炎症人牙周膜细胞(PDLCs)内NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱天冬酶1(Caspase-1)信号通路的调控表达变化.方法 使用三磷酸腺苷(ATP)和脂多糖(LPS)制备炎症PDLCs模型,分别以45℃、5％CO2条件和37℃、5％CO2条件培养正常和炎症PDLCs,CCK8法检测细胞光密度(OD450)值.根据细胞刺激条件,分为3个实验组(ATP+LPS组、热刺激组、ATP+LPS+热刺激组)和1个对照组,采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测各组热休克RNA-1(HSR1)、热休克转录因子 1(HSF-1)、NLRP3、Caspase-1、白介素(IL)-1β、IL-18的表达水平.结果 ①正常PDLCs活性检测结果显示,随着培养时间的延长,37℃培养条件下细胞OD450值逐渐增加,45℃培养条件下细胞OD45o值逐渐降低(F=36.309,P＜0.05);炎症PDLCs活性检测结果显示,随着培养时间的延长,2种温度培养条件下细胞OD450值均逐渐降低(F=23.353,P＜0.05);且不同培养时间的2种温度培养条件下细胞OD45o值比较,.差异均有统计学意义(均P＜0.05);随着培养时间的延长此差异越明显(均P＜0.05).②各组测量指标mRNA相对表达量总的比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).3个实验组各测量指标mRNA相对表达量分别与对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).且与ATP+LPS组比较,热刺激组和 ATP+LPS+热刺激组的HSR1和 HSF-1 mRNA 相对表达量增高,NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA 相对表达量降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 HSR1可能负反馈调节着NLRP3/Caspase-1炎症小体通路,正常和炎症PDLCs抵抗热刺激时的免疫防御反应能力均减弱.
关键词：牙周膜细胞NOD样受体蛋白3NLRP3半胱天冬酶1Caspase-1热刺激
分类号：R78(口腔科学)
资助基金：国家自然科学基金(81371139)江苏省自然科学基金面上项目(BK20201119)
论文发表日期：2022-04-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 197-202 )
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