TIMP-1抑制大鼠肾小球系膜细胞凋亡与磷脂酰肌醇3激酶/丝/苏氨酸激酶通路的研究
王楠
林洪丽
吴泰华
孙艳玲
谢华
王玲
刘越坚
1.大连医科大学附属第一医院肾内科,辽宁,大连,1160112.大连医科大学附属第一医院肾内科,辽宁,大连,1160113.大连医科大学附属第一医院肾内科,辽宁,大连,1160114.大连医科大学附属第一医院肾内科,辽宁,大连,1160115.大连医科大学附属第一医院肾内科,辽宁,大连,1160116.大连医科大学附属第一医院肾内科,辽宁,大连,1160117.大连医科大学附属第一医院肾内科,辽宁,大连,116011
摘要：目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)/丝/苏氨酸激酶(serine threonine kinase,AKT)通路在基质金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)抑制高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞(rat mesangial cells,RMC)凋亡中的作用和机制.方法 (1)脂质体法将正、反义人TIMP-1(hTIMP-1)及空载体转染到大鼠肾小球系膜细胞.(2)Annexin V/PI双染法流式检测系膜细胞凋亡率.(3)Caspase9/Mch6 Colorimetric Assay试剂盒检测Caspase 9活性.(4)Western blot检测BAD、phospho-BAD、AKT、phospho-AKT蛋白水平.结果与对照组(1.06±0.08)%相比,正义转染组细胞凋亡率降低[(4.51±0.50)%,P＜0.05],反义转染组凋亡率显著提高[(24.97±3.64)%,P＜0.05],LY294002的加入可部分抵消TIMP-1的抗凋亡作用.TIMP-1的高表达可下调Caspase 9活性(0.111±0.064,P＜0.05),低表达可上调Caspase 9活性(0.461±0.012,P＜0.05).正义TIMP-1能提高细胞phospho-BAD、phospho-AKT的蛋白水平,而反义TIMP-1的两种蛋白水平明显减少,且该作用可被LY294002阻断.结论(1)PI3K/AKT通路参与TIMP-1抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡过程.(2)BAD在其中起重要作用.(3)AKT对Caspase 9的抑制亦起主要作用.
关键词：PI3K/AKT TIMP-1大鼠肾小球系膜细胞凋亡BAD
分类号：R5(内科学)
资助基金：国家自然科学基金(30477621)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1059-1061 )
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