甲状旁腺功能低下症基因治疗中重组表达体系pCKM-mPTH质粒的构建与表达
朱易凡
王深明
王劲松
1.中山大学附属第一医院甲状腺外科,广州,5100802.中山大学附属第一医院甲状腺外科,广州,5100803.中山大学附属第一医院甲状腺外科,广州,510080
摘要：目的研究构建重组表达体系pCKM-mPTH质粒,寻找甲状旁腺功能低下症的基因治疗途径. 方法采用重叠聚合酶链反应(PCR)法、巢式PCR法及粘端连接法构建pCKM-mPTH质粒,以脂质体转染骨骼肌细胞,用β-actin半定量和放免法分别测定其在细胞内外的表达. 结果嵌合基因 pCKM-mPTH质粒测序完全符合已知核苷酸序列,并完成定点突变,转染骨骼肌细胞后,β-actin半定量法测得mPTH在细胞内成功高效表达,放免法测得24h克隆细胞培养液中甲状旁腺激素蛋白的含量为26.37ng/L. 结论成功构建了SD(Sprague Dawley)大鼠重组基因表达体系pCKM-mPTH质粒,并证实其在骨骼肌细胞中有高效表达.
关键词：甲状旁腺功能低下症基因重组基因治疗
分类号：R6(外科学)
资助基金：国家自然科学基金(39970726)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 671-673 )
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