低氧条件下缺氧诱导因子-1对胎鼠心肌细胞内钙离子转运的影响
张力1
邓春玉2
邝素娟2
章晓华3
庄建3
周成斌1
1.510080 广州,南方医科大学,广东省心血管病研究所,广东省华南结构性心脏病重点实验室2.广东省人民医院医学研究中心,广东省心血管病研究所3.广东省心血管病研究所,广东省华南结构性心脏病重点实验室,广东省医学科学院
摘要：目的 观察低氧条件下缺氧诱导因子-1(HIF-1)对胎鼠心肌细胞内钙离子(Ca2+)转运的影响,探索胎儿心肌保护新方法.方法 取胎龄14~18 d Sprague-Dawley(SD)大鼠胎鼠的心肌细胞置于含5%CO2,3%O2和92%N2的三气培养箱在37℃下培养24 h,分3组进行干预:对照组;HIF-1激动剂(DMOG)100μM(DMOG组);HIF-1抑制剂(Acriflavine)10μM(Acriflavine组).共同作用24 h后,分别进行实时荧光定量PCR(real time-PCR,RT-PCR)和免疫印迹分析(Western-blot)检测胎鼠心肌细胞HIF-1α、L型Ca2+通道(LCa)、T型Ca2+通道(TCa)、钠钙交换蛋白(NCX)、Ryanodine受体和肌质网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)mRNA表达及蛋白水平.在激光共聚焦显微镜下观察心肌细胞内Ca2+浓度的变化.结果 RT-PCR结果显示HIF-1α的mRNA表达量DMOG组较对照组显著升高,Acriflavine组较对照组和DMOG组显著降低,TCa的mRNA表达量DMOG组较Acriflavine组显著升高、NCX的mRNA表达量DMOG组较对照组显著升高,Acriflavine组较对照组和DMOG组显著降低,Rynaodine受体的mRNA表达量Acriflavine组较对照组显著降低,DMOG组较Acriflavine组显著升高,SERCA2α的mRNA表达量Acriflavine组较对照组和DMOG组显著升高(P<0.05,n=5);Western-blot结果显示HIF-1α的蛋白表达量DMOG组较对照组及Acriflavine组均显著升高,LCa的蛋白表达量DMOG组较对照组及Acriflavine组显著升高(P<0.05,n=5).激光共聚焦显微镜下测定钙荧光量,DMOG组较对照组及Acriflavine组显著增加(P<0.001,n=12).结论 在低氧条件下,DMOG过度激活HIF-1,使胎鼠心肌细胞内Ca2+超载明显,Acriflavine抑制HIF-1活性,减轻胎鼠心肌细胞Ca2+超载,增强心肌细胞调节Ca2+的能力,对未成熟心肌起保护作用.
关键词：低氧缺氧诱导因子-1SD胎鼠心肌细胞钙离子转运
资助基金：国家自然科学基金(81370274)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 113-118 )
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