SPIO、GFP双标BDNF基因修饰中脑神经干细胞的研究
杨智勇1
宋晓斌1
邓兴力1
王进昆1
李智高1
刘如恩2
冯忠堂1
1.昆明医学院第一附属医院神经外科,6500322.中日友好医院神经外科,北京,100029
摘要：目的 建立超顺磁氧化铁(SPIO)、绿色荧光蛋白(GFP)双标脑源性神经营养因子(BDNF)基因修饰中脑神经干细胞.方法 以质粒pcDNA3-BDNF、pEGFPN1共转染第3代大鼠胚胎中脑神经干细胞,并用SPIO标记.荧光显微镜检测GFP的表达;免疫细胞化学、Western blot鉴定BDNF的表达;普鲁士蓝染色、透射电镜鉴定SPIO标记.结果 GFP在基因转染12 h后开始表达,24h明显增加,48h达顶峰.免疫细胞化学、Western blot表明:细胞成功表达BDNF.普鲁士蓝染色显示:SPIO标记的中脑神经干细胞内有大量蓝染铁颗粒,细胞标记率达100%.透射电镜显示:SPIO颗粒位于吞饮小泡和细胞质内.结论 成功建立SPIO、GFP双标BDNF基因修饰中脑神经干细胞,为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础.
关键词：神经干细胞超顺磁性氧化铁绿色荧光蛋白脑源性神经营养因子
分类号：R651.15(外科学各论)Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：云南省教育厅科研项目(09Y0153)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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