NEDD4-1shRNA对U251胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响
李季林1
于如同2
盛罗平1
陆林其1
陈仁辉1
陈雪林1
陈华1
顾泉1
石琼2
1.复旦大学附属中山医院青浦分院神经外科,上海,2017002.徐州医学院附属医院神经外科,221002
摘要：目的 探讨NEDD4-1 shRNA对U251胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响.方法 构建NEDIM-1 shRNA表达载体.以不同比例质粒和脂质体转染U251细胞,通过荧光显微镜观察细胞存活情况,优化转染效率.转染48 h后采用Western blot、RT-PCR分别检测NEDD4-1蛋白及mRNA的表达,流式细胞术检测细胞周期,MTT法检测细胞增殖,DAPI荧光染色检测细胞凋亡.结果 NEDD4-1 shRNA表达载体构建成功.脂质体与质粒的最佳转染效率比例为2.5 μl:1 μg,48 h转染效率在60%～700.与对照组比较,转染NEDD4-1 shRNA后,U251胶质瘤细胞NEDD4-1的蛋白及mRNA表达水平均下降(均P<0.05),细胞大多停滞在G<,0>-G<,1>期(均P<0.05),增殖率明显降低(均P<0.05),凋亡率显著增加(均P<0.05).结论 NEDD4-1作为PTEN泛素连接酶,为胶质瘤基因治疗提供靶点.
关键词：神经胶质瘤蛋白NEDD4-1细胞增殖细胞凋亡
分类号：R739.41(神经系肿瘤)
资助基金：江苏省"六大人才高峰"高层次人才项目(07-B-044)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
英文信息