siRNA沉默USP22基因对胶质瘤细胞增殖的抑制作用
李朝晖1
王建2
付红1
李妍哲1
韩亮1
田宇1
1.吉林大学中日联谊医院神经外二科,长春,1300312.内蒙古民族大学附属医院神经外科,通辽,028000
摘要：目的 探讨小干扰RNA (siRNA)沉默泛素特异性肽酶22 (ubiquitin specific protease 22,USP22)对胶质瘤细胞增殖的影响和作用机制.方法 合成USP22 siRNA及阴性对照siRNA (control siRNA),用脂质体Lipofectamine 2000转染至人胶质瘤U87和U251细胞,分别设为实验组和阴性对照组.通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测两组胶质瘤细胞USP22mRNA和蛋白表达水平的变化.采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测USP22 siRNA对两组胶质瘤细胞的增殖抑制率.流式细胞术定量检测USP22 siRNA对胶质瘤细胞凋亡及细胞周期分布的影响.Western blot检测胶质瘤细胞凋亡蛋白和周期调控蛋白的表达.结果 与阴性对照组比较,实验组胶质瘤细胞中USP22 mRNA和蛋白表达显著下降(P＜0.05),细胞增殖明显受到抑制(P＜0.05),凋亡率明显上升(P＜0.05),细胞周期中G2/M期的细胞比例明显增高(P＜0.05).Western blot结果显示:细胞凋亡蛋白Procaspase-3、Procaspase-8、Procaspase-9表达明显下降(P＜0.05);细胞周期蛋白CDK1、CDK2、CyclinBl表达水平明显下降(P＜0.05),CyclinD1表达水平无明显变化(P＞0.05).结论 USP22基因在胶质瘤细胞的增殖中发挥重要作用,其机制可能为调节细胞凋亡和细胞周期.
关键词：神经胶质瘤泛素特异性肽酶22RNA干扰细胞增殖细胞凋亡细胞周期
分类号：R739.41(神经系肿瘤)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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