ST8SIA3在胶质瘤细胞替莫唑胺耐药性的作用
邓知通
赵朝辉
蔡勇
钟兴明
汪一棋
阳建国
费振海
张磊
顾华
杨涛
湖州师范学院附属第一医院神经外科,浙江 湖州 313000
摘要：目的 探讨ST8α-乙酰神经氨酸酶α-2,8-唾液酸转移酶3(ST8SIA3)对胶质瘤产生耐替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)特性的影响.方法 将胶质母细胞瘤细胞株U87-MG进行慢病毒转染,分为对照组、下调组(ST8SIA3表达下调)、过表达组(ST8SIA3过表达),使用qRT-PCR检测3组ST8SIA3相对表达,通过Western-blot检测3组A2B5表达与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferese,MGMT)表达.采用不同TMZ浓度(0µmol/L、5µmol/L、10µmol/L、20µmol/L、50µmol/L、100µmol/L、200µmol/L)与3组细胞培养48h后,使用CCK-8检测并绘制TMZ浓度-细胞生存率曲线.通过单细胞成球实验观察下调组和过表达组ST8SIA3对胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSC)自我更新能力及干细胞标志物(CD133、SOX2)的影响.采用TCGA及CGGA数据库的人脑胶质瘤临床数据,分析ST8SIA3表达与患者预后关系.裸鼠种瘤后记录裸鼠出现恶病质的时间并进行生存分析统计,免疫组织化学方法检测裸鼠原位移植瘤标本MGMT和A2B5表达.结果 过表达组A2B5和MGMT相对表达增加.CCK-8实验结果显示:随着ST8SIA3表达增加,TMZ的LC50(半致死浓度)逐渐升高.单细胞成球实验显示:随着ST8SIA3表达增高,成球细胞数量及体积逐渐增加.裸鼠原位移植瘤模型结果显示:过表达ST8SIA3明显缩短裸鼠生存期;随着ST8SIA3表达增加,Ki-67、A2B5、MGMT表达随之增加.结论 ST8SIA3通过合成干细胞标志物A2B5从而促进U87-MG细胞成球能力,进而表现出GSC耐TMZ特性.
关键词：神经胶质瘤胶质瘤干细胞替莫唑胺耐药性ST8SIA3A2B5
分类号：R730.264(一般性问题)
资助基金：浙江省基础公益研究计划项目(LGF20H160015)
论文发表日期：2024-07-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 424-430 )
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