南瓜SCoT-PCR反应体系的优化与引物筛选
王丰丰
王萍
石磊
杨静
杨琴
1.内蒙古野生特有蔬菜种质资源与种质创新重点实验室·内蒙古农业大学农学院 呼和浩特0100192.内蒙古野生特有蔬菜种质资源与种质创新重点实验室·内蒙古农业大学农学院 呼和浩特0100193.内蒙古野生特有蔬菜种质资源与种质创新重点实验室·内蒙古农业大学农学院 呼和浩特0100194.内蒙古野生特有蔬菜种质资源与种质创新重点实验室·内蒙古农业大学农学院 呼和浩特0100195.内蒙古野生特有蔬菜种质资源与种质创新重点实验室·内蒙古农业大学农学院 呼和浩特010019
摘要:为了构建适合南瓜SCoT-PCR反应的最佳体系,笔者对需要控制的5个变量使用L2s(56)正交试验设计.结果表明,最佳优化体系为:2.5 mmol· L-1 Mg2+、0.40 mmol· L-1 dNTPs、0.5U Taq酶、1.00 μmol·L-1引物、30 ng模板DNA,共20 μL.然后从51个SCoT引物中筛选出多态性明显的引物20个,并优化最适退火温度.最后,对所得优化体系进行可行性验证.该体系有利于SCoT标记在南瓜材料上的应用,构建的优化体系及筛选出的引物可为南瓜分子遗传育种奠定基础.
关键词:南瓜SCoT-PCR体系优化正交设计引物筛选
资助基金:内蒙古科技计划项目(20090707)内蒙古科技计划项目(2010704)内蒙古科技计划项目(20110711)内蒙古科技计划项目(20120212)创新项目(NDPYTD2013-3)
论文发表日期:2017-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 12-17 )
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