发根农杆菌介导甜瓜转基因过表达体系的建立
王平勇
徐永阳
赵光伟
贺玉花
李明
孔维虎
张健
刘水苗
刘梦丽
徐志红
中国农业科学院郑州果树研究所 郑州450009
摘要:遗传转化是实现基因功能验证和基因快速转育的重要手段,但目前甜瓜的遗传转化依旧存在众多技术难题.笔者利用野生型发根农杆菌K599侵染甜瓜‘E31’,成功诱导甜瓜产生了不定根.借助该技术,将含有GUS基因和EGFP基因的过表达载体pCAMBIA3301和pCAMBIA 1300-ProSuper导入发根农杆菌K599,利用转化后的农杆菌侵染甜瓜‘E31’,成功诱导出了不定根.PCR检测结果表明,新生不定根的阳性率达到100%.通过GUS染色和激光共聚焦显微镜检测,在不定根中检测到GUS基因和EGFP基因的大量表达,成功实现了外源基因在甜瓜新生不定根内过表达.该方法周期短、操作方便、转化率高,可实现基因功能的快速验证,为甜瓜根系抗病抗逆方面的研究提供技术支持.
关键词:甜瓜发根农杆菌K599过表达
资助基金:国家自然科学基金(31801888)国家西甜瓜产业技术体系项目(CARS-25)中国农科院科技创新工程专项(CAAS-ASTIP-2019-ZFRI)河南省现代农业产业技术体系建设项目(S2014-11-G03)中央高校基本科研业务费专项(1610192019201)
论文发表日期:2019-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 15-18,30 )
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中国瓜菜

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-2871
年,卷(期):2019,32(12)
所属栏目:试验研究