利用发根农杆菌体系检测西瓜CRISPR/Cas9系统的靶位点
张月乔
葛洁
田树娟
袁黎
1.旱区作物逆境生物学国家重点实验室·西北农林科技大学园艺学院 陕西杨凌 7121002.旱区作物逆境生物学国家重点实验室·西北农林科技大学园艺学院 陕西杨凌 7121003.旱区作物逆境生物学国家重点实验室·西北农林科技大学园艺学院 陕西杨凌 7121004.旱区作物逆境生物学国家重点实验室·西北农林科技大学园艺学院 陕西杨凌 712100
摘要：西瓜遗传转化技术周期长,过程复杂,CRISPR/Cas9基因编辑系统又存在着一定的脱靶效应,为了保障所选择的靶位点的可行性,本研究选择西瓜ClSPO11-1基因(ID:Cla003301)为靶标,利用CRISPR/Cas9基因编辑系统构建双靶点的基因敲除载体,利用发根农杆菌Ar.Qual菌株侵染西瓜子叶外植体,通过简单的组培过程,使西瓜外植体长出不定根,在不定根中检测到了在靶位点1处发生了不同程度的碱基缺失,经过与野生型氨基酸序列比对分析后发现均造成了翻译提前终止和氨基酸的突变,成功实现了对西瓜不定根的基因编辑,该方法周期短,操作简便,实现了快速鉴定在西瓜中选择的靶位点的靶向效率,为研究西瓜基因功能和遗传改良提供了保障.
关键词：西瓜CRISPR/Cas9系统发根农杆菌基因敲除
分类号：S651(瓜果园艺)
论文发表日期：2020-04-05
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 7-11 )
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