发根农杆菌介导的甜瓜CRISPR/Cas9系统靶位点的检测
朱蕾
黑龙江省农业科学院大庆分院 黑龙江大庆 163711
摘要:选取甜瓜栽培材料龙庆八号作为受体材料,构建CmCURT1A基因CRISPR/Cas9基因编辑载体,经发根农杆菌介导检测靶位点的编辑情况,为后续甜瓜遗传转化试验提供载体基础.以甜瓜CmCURT1A基因(ID:ME-LO3C006053.2)为靶基因构建双靶位点敲除载体,经发根农杆菌K599介导的简单遗传转化技术使甜瓜组织长出不定根,经PCR测序发现在不定根中分别存在65 bp、72 bp不同碱基片段的缺失.该方法成功进行了甜瓜CRISPR/Cas9载体靶位点敲除情况的检测,简单高效,实现了在甜瓜中基因编辑靶点的快速鉴定,为研究甜瓜基因功能和遗传改良奠定基础.
关键词:甜瓜CRISPR/Cas9发根农杆菌基因敲除
分类号:S652(瓜果园艺)
资助基金:黑龙江省农业科技创新跨越工程优青项目(CX22YQ32)黑龙江省农业科技创新跨越工程农业特色产业项目(CX23TS11)
论文发表日期:2024-08-05
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:9( 15-23 )
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