pHCN4-DsRed Express2慢病毒载体的构建和鉴定
李颖
高飞
蔡军
秦选光
1.首都医科大学附属北京朝阳医院儿科,北京市,1000202.首都医科大学附属北京朝阳医院儿科,北京市,1000203.首都医科大学附属北京朝阳医院儿科,北京市,1000204.首都医科大学附属北京朝阳医院儿科,北京市,100020
摘要：目的 构建超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因亚型4启动子(HCN4)重组慢病毒载体并进行鉴定.方法 采用Gateway克隆技术,通过attB×attP反应,构建穿梭质粒pUp-HCN4,而后将pLY/Des2-Puro、pUP-HCN4、pDown-DsRed Express2三个质粒通过attL×attR反应.构建成pLV/EXPN2-Puro-HCN4-DsRed Express2质粒,再转染感受态细胞stb13,孵育扩增,离心纯化.采用PCR方法对重组慢病毒载体进行鉴定.结果 基于位点特异性重组原理,应用Gateway克隆技术构建了多基因共表达的pHCN4-DsRed Express2慢病毒载体,通过提取DNA测序,证明该序列与理论值一致.结论 应用Gateway克隆技术成功构建了pHCN4-DsRed Express2慢病毒载体.
关键词：HCN4慢病毒载体Gateway克隆技术
分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)Q785(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 593-596 )
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