不同方法对血管平滑肌细胞表型特性影响的实验研究
尚松安
马占龙
陈相汛
安艳丽
丁洁
滕皋军
1.210009 南京市,江苏省分子影像与功能影像重点实验室,东南大学附属中大医院放射科2.210009 南京市,江苏省分子影像与功能影像重点实验室,东南大学附属中大医院放射科3.210009 南京市,江苏省分子影像与功能影像重点实验室,东南大学附属中大医院放射科4.210009 南京市,江苏省分子影像与功能影像重点实验室,东南大学附属中大医院放射科5.210009 南京市,江苏省分子影像与功能影像重点实验室,东南大学附属中大医院放射科6.210009 南京市,江苏省分子影像与功能影像重点实验室,东南大学附属中大医院放射科
摘要：目的 通过两种分离方法体外获取血管平滑肌细胞(VSMCs),比较细胞表型差异及生物学特性,为血管性疾病研究提供精确实验基础.方法 分别采用组织块法及酶消化法获取SD大鼠胸主动脉VSMCs,分为组织块组与酶消化组.倒置显微镜、结晶紫染色观察形态学改变并定量分析；MTT比色法及TransweU细胞迁移实验分别检测分析细胞增殖与迁移活性；流式细胞周期测定细胞周期分布；细胞免疫荧光染色鉴定VSMCs并测定分析收缩型标记蛋白α-平滑肌肌动蛋白(SMA)以及合成型标记蛋白平滑肌胚胎型肌球蛋白重链(SMemb)、原肌球蛋白-4(TPM-4)表达量的变化.结果 两组细胞SMA细胞免疫荧光染色阳性率≥95％,细胞呈现谷峰状结构生长.组织块组与酶消化组两组细胞长径径值分别为(95.10±16.23)μm和(114.67±15.92)μm.与酶消化组相比,组织块组细胞增殖及迁移活性分别增加23.04％和1.54倍(P＜0.05),S+G2期所占比例增加49.68％(P＜0.05),SMA蛋白表达量下降(P＜0.05),SMemb及TPM-4蛋白表达均增加(P＜0.05).结论 组织块法获取细胞多以合成表型为主,酶消化法则主要呈收缩表型.伴随细胞形态学、增殖及迁移活性、表型特异性蛋白表达等不同改变,两种细胞获取方法可为不同目的研究提供精确的体外模型.
关键词：血管平滑肌细胞表型转化细胞培养
分类号：Q95-93(动物学)R543(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81071193)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 794-797,后插1-后插2 )
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