改良成年小鼠心室肌细胞分离方法
石山慧
吕定超
翟旭雯
李端端
周密
左琳
1.山西医科大学基础医学院生理学系, 山西省太原市,0300012.山西医科大学基础医学院生理学系, 山西省太原市,0300013.山西医科大学基础医学院生理学系, 山西省太原市,0300014.山西医科大学基础医学院生理学系, 山西省太原市,0300015.山西医科大学基础医学院生理学系, 山西省太原市,0300016.山西医科大学基础医学院生理学系, 山西省太原市,030001
摘要：目的 改进小鼠成体心肌细胞的分离方法,以提高小鼠心室肌细胞的成活率和收获量.方法 采用心脏在体主动脉插管,行独创的前加压灌流法冲洗心脏后接入改进的langendorff装置,用胶原酶液Ⅱ灌流、消化心脏后,将心脏剪碎并用吸管吹打,经200目滤网过滤后获得单个小鼠心室肌细胞.检测并对比在体和离体主动脉插管获得的心肌细胞的状态:梯度复钙后,在倒置显微镜下观察细胞的形态和杆状心室肌细胞的数目.结果 研究结果显示,改良的主动脉逆行灌流法在缩短手术时间的同时,提高了小鼠心室肌细胞收获量和存活率.本课题组利用医用三通管,独创倒置灌流排气法,可以迅速排空灌流装置中的气体;利用注射器和灌流针结合,独创前加压灌流法,可以快速彻底地冲洗心脏中的血液;并采用实验室常规眼科镊和血管钳巧妙组合成协助装置,可以单人独立完成插管,不需要助手协助,节约人力,节省经费开支.结论 成年小鼠心室肌细胞分离方法的改进使整个实验流程简化,缩短了实验时间,操作简便易学;同时该分离方法稳定、可靠、有效,可以为同类型实验提供思路和借鉴.
关键词：成年小鼠心室肌细胞分离Langendorff胶原酶
分类号：Q95-33(动物学的研究与实验)R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：81200120)((项目编号)山西省留学回国留学人员科研资助项目(2014-036)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 748-751,766 )
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