人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化
劳兴珍1
吴国球2
沈子龙1
1.中国药科大学生物技术中心,南京,2100092.东南大学附属中大医院检验科,南京,210009
摘要：目的:研究人cTnI基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化.方法:以pCOMb3-cTnI为模板,用PCR方法得到了编码该蛋白的基因,进一步将该基因克隆到中间载体pUCm-T,再酶切得到cTnI基因插入到pKL载体中,构建成表达质粒pKL-cTnI.在BL21细胞中经IPTG诱导表达,利用载体携带6×His纯化标签,以HisTrap Kit纯化重组蛋白,并进行免疫活性测定.结果:融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,并用HisTrapKit成功纯化目的蛋白.ELISA分析证实该重组蛋白具有与天然心肌肌钙蛋白相似的免疫活性.结论:本研究为建立急性心肌梗死早期诊断试剂奠定了基础.
关键词：人心肌肌钙蛋白I原核表达融合蛋白亲和层析急性心肌梗死
分类号：Q343(遗传学分支学科)Q593.3(器官生物化学)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 515-517 )
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