聚乙二醇修饰天花粉蛋白的初步研究
许培1
戎隆富2
王荣海3
宋礼华3
1.安徽大学生命科学院,合肥,2300392.安徽安科生物工程(集团)股份有限公司,合肥,2300883.安徽省生物研究所,合肥,230088;安徽安科生物工程(集团)股份有限公司,合肥,230088
摘要:目的:研究聚乙二醇(PEG)修饰天花粉蛋白(TCS)的条件、纯化方法、生物活性及致过敏反应程度.方法:用SDS-PAGE检测反应条件对产物成分的影响,利用离子交换和分子筛凝胶层析对修饰产物进行分离纯化,通过SDS-PAGE和HPLC检测聚乙二醇化天花粉蛋白(PEG-TCS)的纯度,小鼠引产实验测定PEG-TCS体内生物学活性,用TCS和PEG-TCS作为抗原对豚鼠进行致敏和攻击.结果:在PEG修饰TCS的反应中,PEG与TCS的投料(质量)比和pH值是影响修饰效率的主要因素,修饰反应一般在24~48 h内达到平衡;纯化的PEG-TCS经SDS-PAGE检测纯度大于95%,HPLC显示单一峰;小鼠引产实验表明,经过PEG修饰后的TCS,引产活性加强;豚鼠过敏反应实验表明,PEG-TCS具有极低的全身性过敏反应.结论:PEG修饰TCS的最佳反应条件为:TCS与PEG投料比为1:6,pH6.0,反应时间为48 h,催化剂氰基硼氢化钠浓度为40 mmol·L-1;PEG-TCS纯度大于95%;PEG-TCS体内活性能较好的保留,且全身性过敏反应降低.
关键词:天花粉蛋白聚乙二醇修饰聚乙二醇丙醛引产活性全身性过敏反应
分类号:R965.1(药理学)R392-33(医学免疫学)
资助基金:国家级火炬计划(2003BA758C)安徽省科研项目(01803024)安徽省优秀青年科技基金(04043075)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2026-08-14(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 348-351 )
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