牛气管抗菌肽cDNA的克隆与表达
王永娟
王安平
孙怀昌
1.扬州大学兽医学院,江苏省转基因动物制药工程研究中心,扬州,2250092.扬州大学兽医学院,江苏省转基因动物制药工程研究中心,扬州,2250093.扬州大学兽医学院,江苏省转基因动物制药工程研究中心,扬州,225009
摘要：目的:开发一种有效抑制动物细菌感染的重组抗菌肽.方法:根据已发表的牛气管抗菌肽(bTAP)mRNA序列设计引物,用RT-PCR从奶牛气管上皮细胞总RNA中扩增出214bp的bTAP cDNA,将其克隆入pUCm-T载体进行序列测定,将此cDNA分别克隆入真核表达载体pcDNA3和原核表达载体pGEX-6p-1进行表达研究.结果:测序结果与已发表的bTAP序列有3个碱基差异,其中2个导致氨基酸替换;经微球菌溶解试验证明,注射在小鼠皮下的重组质粒pcDNA-tap能表达有活性的bTAP;抗体测定结果显示重组质粒pcDNA-tap经5次免疫后家兔产生的抗bTAP抗体效价达1∶800;经IPTG诱导后,含重组质粒pGEX-tap大肠杆菌能表达预计大小的GST-bTAP融合蛋白,且能被兔抗bTAP识别.结论:本研究克隆的bTAP cDNA可用于表达研究及相关基因工程产品的开发.
关键词：牛气管抗菌肽cDNA克隆表达
分类号：R965.1(药理学)R915.2(药物基础科学)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1651-1655 )
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