有限稀释法筛选轮状病毒LD9株纯化方法的建立及应用
寇桂英1
余黎1
朱传凤1
王名强1
周旭2
1.兰州生物制品研究所有限责任公司,兰州,7300462.上海生物制品研究所有限责任公司,上海,200052
摘要：目的:建立有限稀释法克隆纯化轮状病毒的试验方法,筛选出感染性强、遗传特性稳定的轮状病毒基因重配株LD9.方法:梯度稀释LD9毒种,用5个稀释度(10-4～10-8)的病毒感染铺满单层Vero细胞的96孔板细胞,培养6d,- 20℃冻融,培养物传代至24孔板继续培养6d,显微镜下观察细胞病变(CPE),- 20℃冻融后检测.以相同方法重复克隆纯化3次,筛选获得病毒滴度稳定、具有稳定遗传特性的纯化病毒,由T25、T75到2,4,10层细胞工厂逐级放大培养.结果:筛选出适用于疫苗生产用的遗传特性稳定、感染性强的LD9疫苗候选株.结论:建立了适用于轮状病毒克隆纯化的筛选方法.
关键词：轮状病毒基因重配株梯度稀释筛选有限稀释法
分类号：R186(流行病学与防疫)
资助基金：国家科技支撑计划(2008BAI66B08)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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