UPLC/Q-TOF-MS法对凝血酶冻干粉中的蛋白组分进行鉴定和定量分析
徐小玲
胡远华
1.湖北省食品药品监督检验研究院,武汉4300642.湖北省食品药品监督检验研究院,武汉430064
摘要：目的:建立UPLC/Q-TOF-MS法鉴定市售凝血酶冻干粉中的蛋白组分并进行定量.方法:样品经胰蛋白酶消化后的多肽混合物,用超高效液相色谱进行分离,并在线进入ESI-Q-TOF-MS检测,获得的肽段一级母离子和碎片离子的高分辨准确质量数据(MSE方法),经ProteinLynx Global Server(PLGS 2.4)软件蛋白质谱库检索,确定其中的蛋白组分,再以Hi3非标记蛋白定量方法对各蛋白组分进行定量,得到质量百分比定量结果.结果:在以猪血为原料生产的26批凝血酶冻干粉中,鉴定出人血白蛋白和21种猪源蛋白,其中,有1家企业的3批样品中鉴定出猪和人血浆成分,其余23批次样品均为猪血浆成分;样品中的猪凝血酶含量在1.9％ ～43.7％之间.在以牛血为原料生产的3批凝血酶冻干粉中共鉴定出17种牛源蛋白;样品中的牛凝血酶含量在49.4％ ～77.6％之间.结论:UPLC/Q-TOF-MS法灵敏度高,选择性好,通过一次分析可对凝血酶冻干粉中蛋白组分同时进行定性和定量,并可获得有关工艺相关的数据信息如来源和种属等,可用于本品的工艺研究以及质量控制研究.该法可以作为同类生化药物质量研究和组分分析的方法.
关键词：凝血酶冻干粉UPLC/Q-TOF-MSMSE蛋白鉴定Hi3定量非标记定量定量蛋白组学
分类号：R917.796(药物分析)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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