发酵类抗生素中残留蛋白通用性测定方法的探讨
王琰
姚尚辰
常艳
崇小萌
马越
胡昌勤
1.中国食品药品检定研究院,北京,1000502.中国食品药品检定研究院,北京,1000503.中国食品药品检定研究院,北京,1000504.中国食品药品检定研究院,北京,1000505.中国食品药品检定研究院,北京,1000506.中国食品药品检定研究院,北京,100050
摘要：目的:本研究探讨并建立了采用凝胶过滤色谱和Bradford法测定发酵类抗生素克拉维酸钾、硫酸链霉素和硫酸卷曲霉素中残留蛋白的分析方法.方法:采用凝胶过滤色谱先将蛋白与抗生素分离,富集蛋白组分,再冻干、复溶,最后利用Bradford法(考马斯亮蓝染色法)对残留蛋白进行测定.分别采用SephadexTMG-15(300mm×15 mm,40 ～120 μm)和SephadexTMG-25(100 mm×26 mm,90 μm)色谱柱,以水为流动相,检测波长为280 nm,柱温30℃,进样量为500 μL.结果:凝胶过滤法收集蛋白组分方法平均回收率约为97.4％,Bradford法的蛋白浓度在2～40 μg· mL-1(r =0.999 6)内线性关系良好,蛋白(BSA)平均回收率约为95.4％,Bradford法的精密度小于3.0％,最低检测限为0.2 μg· mL-1.所建立方法的合成标准不确定度为0.001％,扩展不确定度为0.002％.结论:该方法准确、可靠,重复性好,可用于发酵类抗生素中残留蛋白的检测和控制.
关键词：发酵类抗生素凝胶过滤色谱Bradford法残留蛋白
分类号：R917.795(药物分析)R978.1(药品)
资助基金：国家十二五科技支撑计划“新型分离材料研发与集成示范”(2012BAK25B02)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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