PCSK9单抗生物学活性测定方法的建立
刘春雨
朱磊
张峰
于传飞
王文波
李萌
陈伟
王兰
高凯
1.中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京,1000502.中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京,1000503.中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京,1000504.中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京,1000505.中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京,1000506.中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京,1000507.中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京,1000508.中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京,1000509.中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京,100050
摘要：目的:建立前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)单抗的生物学活性检测方法.方法:利用系列稀释的PCSK9单抗以剂量依赖性方式阻断PCSK9与低密度脂蛋白受体(LDLR)结合,增加低密度脂蛋白(LDL)在HepG2细胞内摄取率,通过BODIPY类荧光染料标记低密度脂蛋白(BODIPY-LDL)检测胞内荧光强度来反映PCSK9单抗的生物学活性,并用PCSK9单抗参比品计算供试品相对百分效价.结果:PCSK9、PC-SK9单抗参比品及供试品在该方法中均存在量效关系,且符合四参数方程式:Y=(A-D)/[1+(X/C)B]+D.利用该法对4批PCSK9单抗供试品进行检测,每批供试品重复试验3次,PCSK9单抗的相对百分效价的平均值在94.25％ ～ 110.77％之间,变异系数均小于15％.结论:该方法灵敏度高、重复性好、结果准确,可作为PCSK9单抗生物学活性测定的常规检测方法.
关键词：单克隆抗体前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)低密度脂蛋白(LDL)低密度脂蛋白受体(LDLR)生物学活性荧光染色
分类号：R917(药物分析)
资助基金：国家“重大新药创制”科技重大专项(2014ZX09304311-001%2012ZX09304010)感谢中国食品药品检定研究院学科带头人培养基金课题(2013X3)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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