抗体偶联药物(RC48)在食蟹猴中抗药性抗体检测方法的建立与验证
杨丽萍1
王凌2
刘志浩2
姜静3
1.烟台毓璜顶医院,烟台,2640002.烟台荣昌生物工程有限公司,烟台,2640063.滨州医学院,烟台,264003
摘要：目的:建立运用Bridging-ELISA检测食蟹猴血清中抗体偶联药物(RC48)抗药抗体的方法,用于检测食蟹猴血清中的抗药物抗体.方法:采用Bridging-ELISA法进行检测,96孔板预先包被RC48,与待测样品中的抗RC48抗体结合形成复合物,依次加入偶联Biotin的RC48和HRP标记的亲和素和底物TMB显色,用酶标仪读取A450nm值,参比波长630 nm;阴性空白对照样品为食蟹猴混合空白血清;阳性对照样品为分别针对MMAE单抗和针对裸抗体多抗的混合抗体.结果:建立了检测抗RC48抗体的Bridging-ELISA法,并进行了方法学验证.确定方法线性范围的精密度CV％≤19.0,灵敏度为85.48 ng·mL-1,筛选临界阈值为1.33,确证临界阈值为67.2％,系统适用性和药物耐受性良好.结论:方法验证结果均符合临床前生物制品免疫原性研究的要求,已用于非临床研究中食蟹猴血清中抗RC48抗体的检测.
关键词：抗药物抗体抗体偶联药物人表皮生长因子-2Bridging-ELISA
分类号：R917(药物分析)
资助基金：重大新药创制"科技重大专项(2014ZX09508004)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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