尼达尼布减轻脂多糖诱导的小鼠急性呼吸窘迫综合征后肺纤维化

黄贵川; 刘代顺; 吴凯峰; 张巍; 龚玲; 朱红兰; 唐洪波; 钟城垚

摘要：目的:探讨尼达尼布对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所诱导的小鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)后肺纤维化的作用.方法:体外实验中,以LPS(O55:B5)刺激C57BL/6小鼠肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞,以不同浓度尼达尼布干预,半定量PCR法检测转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1)、α-平滑肌激动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)、血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF) mRNA的表达水平;ELISA法检测细胞上清液中TGF-β1蛋白的含量.体内实验中,将SPF级6～8周龄雄性C57 BL/6小鼠随机分为0.9％ NaCl溶液对照组、LPS(O111:B4)模型组(实验d1气管内滴入LPS,5 mg· kg-)、LPS+尼达尼布早期干预组(尼达尼布于实验d7 ～d21,50 mg·kg-1·d-1,ig)、LPS+尼达尼布晚期干预组(尼达尼布于实验d 14～d 28,50 mg·kg-1·d-1,ig).实验d 28处死各组小鼠,收集小鼠支气管肺泡灌洗液(brochoalveolar lavage fluid,BALF),计数炎性细胞总数并分类.HE染色及Masson染色观察肺组织炎性改变及肺纤维化变化;碱性水解法检测肺组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量;Western blotting检测肺组织中α-SMA和Ⅰ型胶原的表达.结果:体外实验中,尼达尼布可抑制TGF-β1,α-SMA,FGF-2,PDGF和VEGF mRNA及TGF-β1蛋白的表达.体内实验中,尼达尼布干预能显著减轻小鼠BALF中炎性细胞总数及各种炎性细胞数量.HE染色及Masson染色结果显示,LPS可诱导小鼠ARDS后肺纤维化形成,而尼达尼布早期和晚期干预均能不同程度减轻小鼠肺纤维化程度,均可降低肺组织中Hyp,α-SMA和Ⅰ型胶原的含量,且早期干预效果要优于晚期干预效果.结论:尼达尼布可抑制LPS诱导的小鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化;尼达尼布可减轻LPS导致的小鼠ARDS后肺纤维化.