应用生物膜干涉技术测定治疗性单抗与新生儿Fc受体的亲和力
张峰
武刚
于传飞
王文波
高凯
王兰
1.中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室 卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室,北京,1000502.中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室 卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室,北京,1000503.中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室 卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室,北京,1000504.中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室 卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室,北京,1000505.中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室 卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室,北京,1000506.中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室 卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室,北京,100050
摘要：目的:建立基于生物膜干涉(Biolayer interferometry,BLI)技术检测治疗性单抗与新生儿Fc受体(neonatal Fc receptor,FcRn)亲和力的方法.方法:链霉亲和素(streptavidin,SA)偶联传感器结合生物素标记FcRn后,使用稀释液(0.1％ BSA/0.05％ Tween20/PBS,pH 6.0)封闭传感器后采用BLI方法检测,以稀释液1∶2系列稀释样品(浓度范围为125 ～ 16 000 nmol·L-1),空白对照采用未结合FcRn的传感器检测上述系列稀释样品.结果采用Steady state analysis方式拟合,计算样品平衡常数(KD)值,计算样品各自的95％可信区间(confidence interval,CI),对不同抗体与FcRn的亲和力进行比较.结果:IgG-FcRn结合曲线呈现明显的快结合-快解离形态.应用建立的方法检测不同单抗与FcRn的亲和力结果:bevacizumab与FcRn的亲和力较trastuzumab高95％,存在显著性差异;bevacizumab生物类似药(similar biotherapeutic products,SBP)-1与FcRn亲和力较原研药(reference biotherapeutic products,RBP)有32％的升高,且有显著性差异.其他Cys-偶联药物前后、Lys-偶联药物前后、表达细胞系由SP2/0更换为CHO均未对IgG-FcRn亲和力产生影响.结论:建立了优化的基于生物膜干涉技术检测IgG抗体与FcRn亲和力测定方法,可用于单抗及抗体偶联药物与FcRn亲和力的评价.
关键词：单克隆抗体FcRn生物膜干涉亲和力
分类号：R917(药物分析)
资助基金：国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目(2014ZX09304311-001)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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