肺炎链球菌蛋白PLYd和PsaA的制备与鉴定
谭亚军
王丽婵
卫辰
张华捷
侯启明
张庶民
马霄
1.中国食品药品检定研究院,北京,1000502.中国食品药品检定研究院,北京,1000503.中国食品药品检定研究院,北京,1000504.中国食品药品检定研究院,北京,1000505.中国食品药品检定研究院,北京,1000506.中国食品药品检定研究院,北京,1000507.中国食品药品检定研究院,北京,100050
摘要：目的:对2种肺炎链球菌蛋白肺炎链球菌脱毒溶血素(detoxified pneumolysin,PLYd)和肺炎链球菌表面黏附素(pneumococcal surface adhesin A,PsaA)进行全基因合成、重组表达、制备和鉴定.方法:根据GenBank中PLYd,PsaA的基因序列和氨基酸序列,通过密码子优化和全基因合成的方式获得2种蛋白的基因,在PLY基因中引入多位点突变保证表达的蛋白无毒性,构建无标签、高效重组表达菌株,建立2种重组蛋白的纯化制备方法,并进行抗原鉴定及免疫原性检测.结果:人工合成的PLYd,PsaA基因序列经鉴定与预期一致.2种蛋白在大肠杆菌中均获得了高效表达,表达量在40％以上,经2步纯化其纯度均达到95％.2种蛋白均能与阳性血清产生特异性抗原抗体反应,免疫小鼠后均可诱导产生较高水平的蛋白特异性抗体.结论:成功制备2种无标签肺炎链球菌蛋白PLYd,PsaA,且具备与天然抗原相似的抗原性和免疫原性,为开展应用研究奠定基础.
关键词：肺炎链球菌肺炎链球菌脱毒溶血素肺炎链球菌表面黏附素重组表达免疫原性
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA02A402)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1266-1271 )
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