重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物理化对照品的质量分析
丁有学
陶磊
韩春梅
李响
杨靖清
史新昌
饶春明
1.中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京1000502.中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京1000503.中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京1000504.中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京1000505.中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京1000506.中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京1000507.中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京100050
摘要：目的:对重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物(recombinant human tissue-type plasminogen activator derivative,rPA)的理化对照品进行质量分析.方法:采用纤维蛋白溶圈法测定其生物学活性;紫外分光光度法测定蛋白含量;根据其生物学活性和蛋白含量计算比活性;毛细管电泳法测定等电点;液质联用测定质谱相对分子质量、对氨基酸序列进行验证以及分析其二硫键的连接方式;Edman降解法测定其N-末端氨基酸序列.结果:比活性为5.2×105 IU·mg-1;主区带等电点为7.1;质谱相对分子质量为39 571.50 Da,与理论相对分子质量相差0.40 Da,相对误差为10.1 ppm;测定的氨基酸序列与理论序列一致,氨基酸覆盖率为99％;分子内二硫键的连接方式为:Cys29-Cys71,Cys269-Cys285,Cys135-Cys151,Cys143-Cys212.结论:对rPA理化对照品进行了较为全面的质量分析研究,该对照品符合《人用重组DNA制品质量控制技术指导原则》和《中华人民共和国药典》2015版三部相关要求,可用于产品的常规质量控制.
关键词：重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物(rPA)理化对照品液质联用质量评价
分类号：R915(药物基础科学)
资助基金：国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目(2015ZX09501008-001)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1607-1611 )
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