双靶点抗乳腺癌Del1-9-G129R-T3融合蛋白真核表达载体的构建及体外抗肿瘤活性实验
顾丽1
苏燕2
闫艳1
1.内蒙古科技大学包头医学院病原生物学教研室,包头0140602.内蒙古科技大学包头医学院生物化学与分子生物学教研室,包头014060
摘要：目的:构建融合蛋白Del 1-9-G 129 R-T3真核表达载体,研究融合蛋白相对于人催乳素受体拮抗剂Del1-9-G129R和肿瘤抑素(tumstatin)活性多肽T3对乳腺癌细胞MDA-MB-231和人脐静脉内皮细胞HU-VEC抑制增殖与促进凋亡作用的差异.方法:以质粒pET22b(+)Del1-9-G129R-T3为模板,PCR扩增目的片段Del1-9-G129R-T3和De11-9-G129R,链接至pCDNA3.1(-)/Myc-His A真核表达载体.T3片段由上海生工合成并以直接退火的方式链接载体.qRT-PCR和Western Blot分别检测目的基因在mRNA和蛋白水平的相对表达.CCK8细胞增殖实验和流式细胞术分别测定MDA-MB-231和HUVEC细胞的增殖与凋亡.结果:重组质粒转染MDA-MB-231和HUVEC细胞后,qRT-PCR和Western Blot检测目的基因在细胞内有较高的相对表达.CCK8和流式分析显示,融合蛋白Del1-9-G129R-T3对MDA-MB-231细胞抑制增殖和促进凋亡作用比对照Del1-9-G129R和T3肽效果更显著,而且对MDA-MB-231细胞作用明显高于HUVEC细胞.结论:Del1-9-G129 R-T3相比Del1-9-G129R和T3,对乳腺癌细胞的抑制增殖和促进凋亡效果更佳.MDA-MB-231细胞相比HUVEC细胞,融合蛋白作用更明显.
关键词：融合蛋白Del1-9-G129R-T3真核表达抗肿瘤活性人乳腺癌细胞人脐静脉内皮细胞
分类号：R965.1(药理学)R979.1(药品)
资助基金：内蒙古自治区自然科学基金(2015MS0855)
论文发表日期：2019-12-31
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 3016-3023 )
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