柱前衍生化HPLC法测定天麻提取物中18种氨基酸含量
蒋清伟1
王威1
刘姝畅1
张印广1
王迷娟2
张猛1
1.北京协和制药二厂,北京1026002.北京协和药厂,北京102600
摘要:目的:建立柱前衍生化高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定天麻提取物中18种氨基酸的含量.方法:供试品在6 mol·L-1盐酸中110℃水解24 h,与异硫氰酸苯酯进行衍生化反应.采用Waters Symmetry(R)C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为0.1 mol·L-1乙酸钠缓冲液(pH 6.5)-乙腈(97∶3),流动相B为乙腈-水(80∶ 20),以1.0 mL· min-1的流速进行梯度洗脱,检测波长为254 nm,柱温为35℃.结果:18种氨基酸衍生物能够完全分离(分离度>2.0),在1.0~10.0μg·mL-1浓度范围内线性良好(r >0.999),且供试品溶液在16 h内稳定,平均回收率(n=6)在92.5% ~ 103.8%之间,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均<3.0%.经检测,3批天麻提取物中氨基酸总含量分别为4.51%,4.20%和4.18%.结论:经方法学验证,本法可适用于天麻提取物中18种氨基酸含量的测定.
关键词:天麻提取物异硫氰酸苯酯柱前衍生化氨基酸含量高效液相色谱法
分类号:R932(生药学(天然药物学))
资助基金:重大新药创制"科技重大专项(2015ZX09101-023)
论文发表日期:2020-08-15
在线出版日期:2026-08-14(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 1785-1790 )
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中国新药杂志

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ISSN:1003-3734
年,卷(期):2020,29(15)
所属栏目:实验研究