肝素抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子效价测定用标准试剂的研制
王悦
李京
王鑫钰
刘莉莎
范慧红
1.中国食品药品检定研究院,北京1026292.中国食品药品检定研究院,北京1026293.中国食品药品检定研究院,北京1026294.中国食品药品检定研究院,北京1026295.中国食品药品检定研究院,北京102629
摘要：目的:研制我国首批肝素、低分子肝素抗Ⅹa因子和抗Ⅱa因子效价测定用标准化试剂.方法:Ⅱa因子试剂使用纤维蛋白原凝固法对效价进行赋值,效价溯源至凝血酶国家标准品;抗凝血酶Ⅲ采用生色底物法对效价进行赋值,效价溯源至WHO国际对照品;Ⅹa因子效价采用全自动血凝仪进行测定,溯源至国家人凝血因子国家标准品;S-2765,S-2238生色底物和游离pNA含量采用反相色谱进行分离,色谱柱为Age-la Technologies Venusil XBP RP C18(250 mm × 4.6 mm,5 μm);流动相A 为20％乙腈与0.1％三氟醋酸溶液,流动相B为60％乙腈与0.1％三氟醋酸溶液;检测波长:313 nm;梯度洗脱;酶和底物亲和力通过米氏常数进行评价.结果:Ⅱa因子、Ⅹa因子、抗凝血酶每支效价结果分别为40 IU、76.3 nKat和10IU;pNA的定量限与检出限分别为7.6和2.3 ng·mL-1;线性范围为0.005～100 μg·mL-1,r =1.0;加样回收率在98.5％～102.3％范围内;S-2765,S-2238发色底物含量分别为96.2％和97.3％;进口试剂与标准试剂米氏常数无统计学差异.结论:通过本研究对标准试剂较为全面的质量考察结果来看,标准试剂可完全替代进口试剂,且标准试剂效价赋值更为准确.
关键词：肝素低分子肝素Ⅹa因子Ⅱa因子抗凝血酶发色底物
分类号：R917(药物分析)
资助基金：中国食品药品检定研究院中青年发展研究资助项目(2012A5)
论文发表日期：2021-01-15
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 73-79 )
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