定量检测人血清中可溶性PD-L1蛋白浓度的方法开发及验证
高恩惠1
张瑞霞2
黄应峰2
满素勤3
程远国4
1.上海工程技术大学,上海201620;中国医药工业研究总院国家上海新药安全评价中心,上海201203;上海益诺思生物技术股份有限公司,上海2013202.宝船生物医药科技(上海)有限公司,上海2012033.中国医药工业研究总院国家上海新药安全评价中心,上海201203;上海益诺思生物技术股份有限公司,上海2013204.上海工程技术大学,上海201620;中国医药工业研究总院国家上海新药安全评价中心,上海201203
摘要：目的:建立一种基于电化学发光法的高灵敏度、高特异性、快速的人血清中可溶性PD-L1(sPD-L1)浓度的定量检测方法,并对该方法进行全面验证.方法:基于Meso Scale Discovery(MSD)技术平台,以鼠抗体PD-L1抗体(mouse anti-human PD-L1 antibody)作为捕获抗体,并采用生物素标记的羊抗人PD-L1抗体(biotinylated goat anti-human PD-L1 antibody)作为检测试剂,定量检测人血清中sPD-L1浓度.该研究对检测方法的关键参数进行了优化,并对该方法的定量范围、准确度和精密度、回收率、稳定性、稀释线性、选择性等性能进行方法学验证.结果:建立了高灵敏度、高特异性的快速检测人血清中sPD-L1的MSD方法并完成方法学验证.该方法定量范围为9.375～1200 pg·mL-1,精密度、准确度、回收率、稀释线性及选择性良好,样品室温放置4.3 h,稀释处理后实验台放置4.3 h,冷藏冰箱(2℃ ～8℃)存放24.4 h,经冻融3次,超低温冰箱(-90℃ ～-70℃)放置101 d稳定.结论:经过方法学验证,该方法可以用于血清中sPD-L1浓度的定量分析,为PD-1/PD-L1免疫检查点相关药物的临床研究药效学评价提供理论依据,在个性化治疗和伴随诊断领域也有潜在的应用价值.
关键词：可溶性PD-L1电化学发光技术方法学验证
分类号：R927.2(药典、药方集（处方集）、药物鉴定)
资助基金：重大新药创制"科技重大专项(2020ZX09201-013)上海市研发公共服务平台项目(18DZ2290100)浦东新区科技发展基金(PKX2019-S09)
论文发表日期：2021-08-15
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1374-1380 )
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