新型冠状病毒灭活疫苗N蛋白含量双抗体夹心ELISA检测方法的建立与应用
赵玉秀1
英志芳2
宋彦丽1
李爱灵1
郭彦岑1
董圆1
李艳1
王辉1
1.北京生物制品研究所有限责任公司,北京1001762.中国食品药品检定研究院,北京102600
摘要：目的:建立新型冠状病毒(SARS coronavirus 2,SARS-CoV-2)灭活疫苗N蛋白含量双抗体夹心ELISA检测方法,并对其进行验证及初步应用.方法:首先包被重组N蛋白,采用间接ELISA方法测定不同抗体对N蛋白的亲和能力.再选取高亲和力的抗体rN003作为包被抗体,rN002作为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA检测方法并确定病毒裂解方法.测定该方法的线性范围、准确度、精确度、中间精密度、特异性及灵敏度,并用该方法测定6批SARS-CoV-2灭活疫苗中N蛋白的含量.结果:N蛋白含量在0.018～0.75μg·mL-1范围内该方法呈现良好的线性关系(R2>0.98),回收率在80％ ～120％之间,CV<10％.6批样品N蛋白含量均占总蛋白的10％ ～20％,样品均一性较好.结论:本研究成功建立了SARS-CoV-2灭活疫苗N蛋白含量双抗体夹心ELISA检测方法,该方法具有良好的线性、准确度、精确度、中间精密度、特异性及灵敏度,能满足SARS-CoV-2灭活疫苗N蛋白含量的检测.
关键词：新型冠状病毒N蛋白夹心ELISA方法
分类号：R978.7(药品)
资助基金：国家重点研发计划(2020YFC0842100)
论文发表日期：2021-10-15
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1787-1793 )
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