定量检测百日咳黏附素的ELISA法建立及初步应用
祝传顺
周振发
洪禹
薛莹
刘冉
唐林
姚雷
朱卫华
北京智飞绿竹生物制药有限公司,北京100176;北京市细菌性疫苗工程技术研究中心,北京100176
摘要：目的:建立定量检测吸附无细胞百白破(组分)联合疫苗(DTaP)生产过程中黏附素(pertactin,PRN)含量的方法.方法:以高效价兔抗PRN多克隆抗体为包被抗体,羊抗PRN多抗为检测抗体,采用辣根过氧化物酶标记的兔抗羊抗体,建立双抗体夹心间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定PRN抗原的含量并进行方法学验证.结果:建立的ELISA法在3.90625～500 ng·mL-1 PRN浓度区间有最佳线性,相关系数r>0.95;该法对PRN检测有良好的特异性;实验内和实验间检测250,60,15 ng·mL-1浓度下PRN含量,变异系数为1.987％ ～9.785％、回收率为93.1％ ～103.5％.该法精密度和准确度较好,该法的定量限度为15 ng·mL-1.同时探讨了建立的双抗体夹心ELISA法的初步应用,测定了PRN纯化步骤的回收率以及联合疫苗中PRN组分的含量和吸附率.结论:建立的ELISA法可有效检测百日咳疫苗纯化过程中PRN的含量,为DTaP生产过程的质量控制奠定了重要基础.
关键词：酶联免疫吸附测定百日咳黏附素质量控制定量ELISA
分类号：R927(药典、药方集（处方集）、药物鉴定)
论文发表日期：2022-05-15
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 854-858 )
英文信息