鸢尾甲苷A和鸢尾甲苷B的制备及其体外抗炎机制研究
郭文慧1
高萌1
杨元丰2
熊豪1
陈海芳1
朱文杰1
杨武亮1
1.江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室,南昌 3300042.江中药业股份有限公司,南昌 330004
摘要：目的:从射干中分离制备高纯度的鸢尾甲苷A和鸢尾甲苷B,并探究其体外抗炎活性及机制.方法:采用聚酰胺柱色谱-重结晶法相结合从射干中分离纯化制备鸢尾甲苷A及鸢尾甲苷B单体;采用改良的Ellman比色法测定鸢尾甲苷A和鸢尾甲苷B对乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)活性的影响;采用CCK-8法测定不同浓度的鸢尾甲苷A和鸢尾甲苷B对细胞活力的影响,确定给药范围;以脂多糖(lipopo-lysaccharide,LPS)诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞为炎症模型,采用Griess法检测细胞上清液中一氧化氮(ni-tric oxide,NO)的含量,Elisa法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(inter-leukin-1β,IL-β)和 IL-6 含量;Western blot 法检测细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、α7 烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)蛋白表达.结果:聚酰胺对鸢尾甲苷A及鸢尾甲苷B有良好的分离纯化效果,并通过重结晶得到鸢尾甲苷A和鸢尾甲苷B单体,经HPLC峰面积归一化法计算其纯度均＞98％;鸢尾甲苷A和鸢尾甲苷B对AChE具有一定的抑制作用;鸢尾甲苷A和鸢尾甲苷B给药浓度在12.5～200 µg·mL-1范围内对RAW 264.7细胞无抑制作用;与LPS模型组比较,鸢尾甲苷A和鸢尾甲苷B均能抑制细胞中NO,TNF-α,IL-β,IL-6的释放(P＜0.05),且呈剂量关系,并能上调胆碱能抗炎通路α7nAChR蛋白表达(P＜0.05)及下调花生四烯酸通路中COX-2蛋白和NO通路中iNOS蛋白的表达(P＜0.05).结论:鸢尾甲苷A和鸢尾甲苷B具有一定的体外抗炎活性,其抗炎机制是通过调节胆碱能抗炎通路、花生四烯酸代谢通路及NO通路,减少巨噬细胞中NO,TNF-α,IL-β和IL-6等炎性介质的释放,实现多途径抗炎作用.
关键词：鸢尾甲苷A鸢尾甲苷B聚酰胺柱色谱-重结晶乙酰胆碱酯酶体外抗炎RAW264.7细胞
分类号：R965.1(药理学)R975.5(药品)
资助基金：江西中医药大学中药炮制技术继承与创新团队项目(CXT22003)江西中医药大学博士启动基金课题项目(2021WBZR003)
论文发表日期：2024-09-30
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 1943-1951 )
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