全自动血凝仪测定瑞替普酶效价研究
王绿音1
白璧炜2
许凯心3
王宇晨4
吕萍1
李懿1
李晶1
1.中国食品药品检定研究院,药品监管科学全国重点实验室,国家卫生健康委生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室,国家药品监督管理局化学药品质量研究与评价重点实验室,北京 1026292.黑龙江省药品检验研究院,哈尔滨 1500883.中国药科大学,南京 2111984.北京石油化工学院,北京 102627
摘要：目的:建立全自动血凝仪测定瑞替普酶(reteplase,rPA)效价的方法,并考察其作为质量控制方法的可行性.方法:采用全自动血凝仪凝固法,依次加入样品或标准品系列溶液、凝血酶(中间试剂)及人血浆纤维蛋白原和纤溶酶原的混合溶液(起始试剂).反应温度为37℃,检测波长为405 nm,检测时间和延迟时间分别为900 和10 s,算法为阈值法(曲线百分比).测定rPA标准品溶液(600,800,1000,1200,1400 ng·mL-1)和样品系列溶液(800,1 000,1200 ng·mL-1)的凝块溶解时间.采用标准曲线法计算rPA样品的浓度和效价(U·mL-1).在实验室内进行专属性、准确度、线性与范围、精密度、耐用性等全面的方法学验证.分别采用血凝仪法和气泡上升法测定2 批注射用rPA和 1 批rPA原液的效价.结果:rPA标准曲线线性回归方程为Y=-0.588 7X+4.508,R2=0.995 7.人血清白蛋白和本品的处方缓冲液均不显示纤维蛋白凝块溶解活性,方法的专属性较好.5 个效价水平(60%,80%,100%,120%,140%)的中间精密度(CV,%)和重复性(CV,%)均<2%,相对偏倚均在0.29%～1.01%范围内,方法的准确度和精密度较好.采用本方法能有效检测注射用rPA制剂原液样品的效价,检测结果与传统气泡上升法无统计学差异,自动化血凝仪法的精密度更优.结论:本研究建立的全自动血凝仪效价检测方法操作简便、耗时短、准确度高、精密度好,较气泡上升法具有显著优势,可作为rPA的体外药效评价和质量控制方法.
关键词：瑞替普酶全自动血凝仪凝块溶解活性效价方法学验证
分类号：R917(药物分析)
资助基金：药品监管科学全国重点实验室第二批课题资助项目(2024SKLDRS0203)
论文发表日期：2025-10-30
在线出版日期：2026-08-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 2209-2216 )
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